Wie wähle ich die richtige Spalte aus?

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Date:2021-11-04 17:32:46 Thursday

Summary: ① Packungsmatrix der Chromatographiesäule A. Kieselgelmatrix: hohe Reinheit, niedrige Kosten, hohe Festigkeit, einfache chemische Modifizierung, aber der pH-Bereich ist begrenzt. Die meisten Silica-Matrix-Füllstoffe sind zwischen pH 2–8 stabil......

① Packungsmatrix der Chromatographiesäule
A. Kieselgelmatrix: hohe Reinheit, niedrige Kosten, hohe Festigkeit, einfache chemische Modifizierung, aber der pH-Bereich ist begrenzt. Die meisten Silica-Matrix-Füllstoffe sind zwischen pH 2–8 stabil, aber die speziell modifizierte Silicagel-gebundene Phase kann bei pH 1,5–10 stabilisiert werden.
B. Polymermatrix: breiter pH-Anwendungsbereich, stabile Temperatur (hohe Temperatur kann über 80 Grad erreichen) und geringe mechanische Festigkeit.
②Partikelform
Die meisten modernen HPLC-Füllstoffe sind kugelförmige Partikel, manchmal aber auch unregelmäßige Partikel. Kugelförmige Partikel sorgen für einen niedrigeren Säulendruck, eine höhere Säuleneffizienz und -stabilität sowie eine längere Säulenlebensdauer. Bei Verwendung einer hochviskosen Aktivphase; unregelmäßige Partikel haben eine größere spezifische Oberfläche und einen relativ niedrigen Preis.
③Partikelgröße
Je kleiner die Partikelgröße, desto höher die Effizienz und desto höher die Auflösung, aber gleichzeitig führt dies zu einem höheren Säulendruckabfall. Wählen Sie 1,5-3 μm Verpackungsmaterial, um einige komplexe Proben zu lösen, UPLC kann 1,5 μm Verpackung verwenden; eine weitere Packung mit einer Partikelgröße von 10 μm oder größer wird als semipräparative oder präparative Säule verwendet.
④Kohlenstoffgehalt
Der Kohlenstoffgehalt einer Chromatographiesäule bezeichnet das Verhältnis der gebundenen Phase an der Oberfläche des Kieselgels, das in Relation zur spezifischen Oberfläche und Bindungsbedeckung steht. Ein hoher Kohlenstoffgehalt verbessert die Säulenkapazität, Auflösung und Analysezeit und wird für komplexe Proben verwendet, die eine hohe Auflösung erfordern; niedriger Kohlenstoffgehalt hat eine kurze Analysezeit und zeigt unterschiedliche Selektivität und wird für die schnelle Analyse einfacher Proben und stark wasserhaltiger aktiver Phasen verwendet. Zustandsmuster. Im Allgemeinen liegt der Kohlenstoffgehalt von C18 zwischen 7 und 19 %.
⑤ Porengröße und spezifische Oberfläche
Das HPLC-Adsorptionsmedium besteht aus porösen Partikeln, und der größte Teil der Reaktionsoberfläche befindet sich in den Poren. Daher müssen Moleküle in die Poren eindringen, um adsorbiert und getrennt zu werden.
Die Porengröße der Chromatographiesäule und die spezifische Oberfläche sind zwei sich ergänzende Konzepte. Die Porengröße ist klein und die spezifische Oberfläche groß und umgekehrt. Große spezifische Oberfläche, Erhöhung der Reaktion zwischen der Probe und der gebundenen Phase, Erhöhung der Lagerung, Probenbeladung und Trennung komplexer Komponenten; kleine spezifische Oberfläche, schnelle Äquilibrierungszeit, geeignet für Gradientenanalyse.
⑥ Porenvolumen und mechanische Festigkeit
Porenvolumen, auch als "Porenvolumen" bekannt. Bezieht sich auf die Größe des Hohlraumvolumens pro Partikel. Es kann die mechanische Festigkeit des Füllstoffs gut widerspiegeln. Füllstoffe mit großem Porenvolumen haben eine etwas schwächere mechanische Festigkeit als solche mit kleinem Porenvolumen. Füllstoffe mit einem Porenvolumen von 1,5 ml/g oder weniger werden hauptsächlich für die HPLC-Trennung verwendet, während Füllstoffe mit einem Porenvolumen von mehr als 1,5 ml/g für die Größenausschlusschromatographie und die Niederdruckchromatographie verwendet werden.
⑦ Endkappe
Säulenendkappen können die Tailing-Peaks von polaren basischen Verbindungen aufgrund der Wechselwirkung mit exponierten Silanolgruppen reduzieren. Die unblockierte gebundene Phase hat eine andere Selektivität als die blockierte gebundene Phase, insbesondere bei polaren Proben.